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中医百科
类别:中国药典
分类:
第一部
【处方】
龟甲60g
鹿角240g
楮实子75g
枸杞子45g
人参22.5g
茯苓20g
【制法】
以上六味,龟甲、鹿角加水煎煮二次,每次12小时,合并煎液,滤过,滤液备用。其余楮实子等四味,加水煎煮二次,第一次2小时,第二次1.5小时,合并煎液,滤过,滤液与上述滤液合并,浓缩至相对密度为1.24~1.26(80℃)的稠膏,加适量糖粉,制成颗粒,干燥,制成1000g,即得。
【性状】
本品为浅棕黄色的颗粒;味甜。
【鉴别】
(1)取本品10g,加水70ml,加热回流30分钟,放冷,离心,取上清液,用乙酸乙酯30ml振摇提取,提取液浓缩至5ml,作为供试品溶液。另取枸杞子对照药材0.5g,同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(通则0502)试验,吸取上述两种溶液各20μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以乙酸乙酯-三氯甲烷-甲酸(3:2:1)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。
(2)取本品40g,加三氯甲烷100ml,加热回流1小时,放冷,离心,弃去三氯甲烷液,药渣挥干溶剂,加水饱和正丁醇40ml,超声处理30分钟,放冷,离心,上清液加3倍量氨试液,摇匀,放置分层,取上层液回收溶剂至干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液。另取人参对照药材1g,加三氯甲烷40ml,同法制成对照药材溶液。再取人参皂苷Rg1对照品,加甲醇制成每1ml含2mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(通则0502)试验,吸取供试品溶液20μl,对照药材溶液及对照品溶液各1~5μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水(15:40:22:10)10℃以下放置的下层溶液为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点显色清晰,分别置日光及紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱和对照品色谱相应位置上,分别显相同颜色的斑点或荧光斑点。
(3)取本品40g,加乙醇100ml,超声处理30分钟,离心,取上清液,蒸干,残渣加乙醇0.5ml使溶解,作为供试品溶液。另取茯苓对照药材1g,加乙醇50ml,同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(通则0502)试验,吸取供试品溶液20μl,对照品溶液2μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以石油醚(60~90℃)-乙醚(3:2)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。
(4)取本品10g,加1%碳酸氢铵溶液50ml,超声处理30分钟,用滤纸滤过,再用0.22μm微孔滤膜滤过,取续滤液100μl,置微量进样瓶中,加胰蛋白酶10μl(取序列分析用胰蛋白酶,加1%碳酸氢铵溶液制成每1ml中含1mg的溶液,临用时配制),摇匀,37℃恒温酶解12小时,作为供试品溶液。另取龟甲胶对照药材、鹿角胶对照药材各0.1g,加1%碳酸氢铵溶液50ml,超声处理30分钟,摇匀,用0.22μm微孔滤膜滤过,同法制成对照药材溶液。照高效液相色谱-质谱法(通则0512或通则0431)试验,以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(色谱柱内径为2.1mm);以乙腈为流动相A,以0.1%甲酸溶液为流动相B,按下表中规定进行梯度洗脱;流速为每分钟0.3ml。采用质谱检测器,电喷雾正离子模式(ESI+),进行多反应监测(MRM),选择质荷比(m/z)631.3(双电荷)→546.4和631.3(双电荷)→921.4作为龟甲检测离子对,选择质荷比(m/z)765.4(双电荷)→554.0和765.4(双电荷)→733.0作为鹿角检测离子对。取龟甲胶对照药材溶液、鹿角胶对照药材溶液,进样5μl,按上述检测离子对测定的MRM色谱峰的信噪比均应大于3:1。