抑肽酶-小库网

板块：中医百科   类别：中国药典第二部   分类：品种正文　第一部分

本品系自牛胰或牛肺中提取、纯化制得的具有抑制蛋白水解酶活性的多肽。按无水物计算，每1mg抑肽酶的活力不得少于3.0单位。

【制法要求】

本品应从检疫合格的牛胰或肺中提取，生产过程应符合现行版《药品生产质量管理规范》的要求。本品为动物来源，工艺中应进行病毒的安全性控制。

【性状】

本品为白色至微黄色粉末。

本品在水或0.9%氯化钠溶液中易溶，在乙醇、丙酮或乙醚中不溶。

【鉴别】

（1）取本品与胰蛋白酶，分别加水溶解并稀释制成每1ml中含1mg的溶液，各取10μl置点滴板上，混匀后，加对甲苯磺酰-L-精氨酸甲酯盐酸盐试液0.2ml，放置数分钟后，应不显紫红色。以胰蛋白酶溶液10μl作对照，同法操作，应显紫红色。

（2）在N-焦谷氨酰-抑肽酶和有关物质项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。

【检查】

吸光度　取本品，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每1ml中含3.0单位的溶液，照紫外-可见分光光度法（通则0401）测定，在277nm的波长处有最大吸收，吸光度不得过0.8。

酸度　取本品，加水溶解并稀释制成每1ml中含5mg的溶液，依法测定（通则0631），pH值应为5.0～7.0。

溶液的澄清度　取本品，加水溶解并稀释制成每1ml中含2mg的溶液，依法检查（通则0902第一法），溶液应澄清。

高分子蛋白质　照分子排阻色谱法（通则0514）测定。

供试品溶液　取本品，加水溶解并定量稀释制成每1ml中含5单位的溶液。

系统适用性溶液　取经112℃加热2小时处理过的抑肽酶适量，加水溶解并稀释制成每1ml中含5单位的溶液。

色谱条件　以亲水的改性硅胶为填充剂（TSKgel G4000SWXL柱，7.8mm×300mm，8μm或其他适宜的色谱柱），用3根色谱柱串联；以3mol/L醋酸溶液为流动相；流速为每分钟1.0ml；检测波长为280nm；柱温为35℃；进样体积100μl。

系统适用性要求　系统适用性溶液色谱图中，二聚体峰相对抑肽酶峰的保留时间约为0.9；二聚体峰与抑肽酶峰间的分离度应大于1.0；抑肽酶主峰的拖尾因子不得大于2.5。

测定法　精密量取供试品溶液，注入液相色谱仪，记录色谱图。

限度　供试品溶液色谱图中，保留时间小于抑肽酶主峰的均为高分子蛋白质峰，按峰面积归一化法计算，高分子蛋白质的总量不得大于1.0%。

去丙氨酸-去甘氨酸-抑肽酶和去丙氨酸-抑肽酶　照毛细管电泳法（通则0542）测定。

供试品溶液　取本品适量，加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含5单位的溶液。

对照品溶液　取抑肽酶对照品，加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含5单位的溶液。

电泳条件　用熔融石英毛细管为分离柱（75μm×600mm，有效长度500mm）；以120mmol/L磷酸二氢钾缓冲液（pH 2.5）为操作缓冲液；检测波长为214nm；毛细管温度为30℃；操作电压为12kV。进样端为正极，1.5kPa压力进样，进样时间为3秒。每次进样前，依次用0.1mol/L氢氧化钠溶液、去离子水和操作缓冲液清洗毛细管柱2、2和5分钟。

系统适用性要求　对照品溶液电泳图中，去丙氨酸-去甘氨酸-抑肽酶峰相对抑肽酶峰的迁移时间为0.98，去丙氨酸-抑肽酶峰相对抑肽酶峰的迁移时间为0.99；去丙氨酸-去甘氨酸-抑肽酶峰与去丙氨酸-抑肽酶峰间的分离度应大于0.8，去丙氨酸-抑肽酶峰与抑肽酶峰间的分离度应大于0.5。抑肽酶峰的拖尾因子不得大于3。

测定法　取供试品溶液进样，记录电泳图。

限度　按公式100（ri/rs）计算，其中ri为去丙氨酸-去甘氨酸-抑肽酶或去丙氨酸-抑肽酶的校正峰面积（峰面积／迁移时间），rs为去丙氨酸-去甘氨酸-抑肽酶、去丙氨酸-抑肽酶与抑肽酶的校正峰面积总和。去丙氨酸-去甘氨酸-抑肽酶的量不得大于8.0%，去丙氨酸-抑肽酶的量不得大于7.5%。

N-焦谷氨酰-抑肽酶和有关物质　照高效液相色谱法（通则0512）测定。

供试品溶液　取本品适量，加流动相A溶解并稀释制成每1ml中约含5单位的溶液。

对照品溶液　取抑肽酶对照品，加流动相A溶解并稀释制成每1ml中约含5单位的溶液。

色谱条件　用阳离子色谱柱（TSK-GEL IC-Cation-SW柱，7.8mm×750mm，10μm或其他适宜的色谱柱）；以磷酸盐缓冲液（取磷酸二氢钾3.52g、磷酸氢二钠7.26g，加水1000ml使溶解）为流动相A，以磷酸盐-硫酸铵缓冲液（取磷酸二氢钾3.52g、磷酸氢二钠7.26g、硫酸铵66.07g，加水1000ml使溶解）为流动相B，按下表进行梯度洗脱；流速为每分钟1.0ml；检测波长为210nm；柱温为40℃；进样体积40μl。